紫色色杆菌 Chromobacterium violaceum CV026

质粒/菌株

质粒改造
质粒抗性改造组成型/诱导型荧光质粒质粒复制起点更换质粒启动子替换合成生物学质粒构建
现货质粒菌株
大肠杆菌载体 E.coli Vector 大肠杆菌宿主菌株 E.coli 细菌广宿主载体 bacateria broad range host vector 链霉菌载体及菌株 Streptomyces 芽孢杆菌载体 Bacillus vector 芽孢杆菌宿主菌株乳酸菌载体 lactic acid bacteria vector 乳酸菌宿主菌株 lactic acid bacteria strain 细菌基因敲除载体毕赤酵母载体毕赤酵母宿主菌株酿酒酵母载体酿酒酵母宿主菌株丝状真菌载体 mold/fungi vector 乳酸克鲁维酵母载体酵母真菌基因敲除基因编辑载体植物细胞载体 plant cell vector 农杆菌菌株Agrobacterium tumefaciens strain 植物细胞基因敲除载体 plant cell 哺乳动物细胞载体哺乳动物细胞荧光载体荧光素酶报告基因载体哺乳动物细胞基因敲除基因编辑载体杂交系统慢病毒载体腺病毒载体逆转录病毒载体杆状病毒表达载体基因干扰 RNAi载体基因/cDNA/ORF 转座子质粒系统 transposon 金黄色葡萄球菌载体 staphylococcus aureus 假单胞菌载体噬菌体 phage 不动杆菌载体双岐杆菌载体藻类表达载体链球菌载体厌氧菌载体基因治疗载体大肠杆菌基因突变体菌株细菌荧光质粒白色念珠菌载体体外转录载体谷氨酸棒杆菌载体酿酒酵母基因突变体菌株线虫载体斑马鱼载体 Zebra fish 果蝇，昆虫载体Drosophila 鱼类细胞载体 fish cell 分支杆菌载体克雷伯菌枯草芽孢杆菌基因缺失突变株
工程菌菌株
质粒菌株资料

产品编号	产品名称
pO007	紫色色杆菌 Chromobacterium violaceum CV026

产品介绍

	30°C，卡那霉素抗性（10-20 ug/ml）
	1、紫色杆菌（Chromobacterium violaceum) CV026，自身不产生N-酰基-高丝氨酸内酯（AHLs）类信号分子，仅当外源AHLs信号分子出现时，菌株才能够产生紫色菌素，并检测出环境中的信号分子C4-HSL～C8-HSL。 2、C.violaceum是一种革兰氏阴性菌, 其紫色杆菌素的产生受群体感应系统的严密调控, 可以作为群体感应抑制活性的筛选模型[1].C.violaceum ATCC12472是一种野生型紫色杆菌, 它可以自主产生信号分子调控紫色杆菌素的产生.而C.violaceum CV026是C.violaceum ATCC31532的mini-Tn5的突变体, 不能自主产生信号分子, 因此不会产生紫色杆菌素，只有当添加外源信号分子时, 才能启动其群体感应系统并产生紫色杆菌素[2]. 3、CV026菌种的复苏：将-80℃保存的紫色杆菌CV026接种于LB肉汤，30℃过夜培养。以2%接入量接种于10 m L含有10μg/mL卡那霉素的LB肉汤中，30℃培养24h,用于后续实验。 4、AHLs标准品：C4-HSL、C6-HSL、C8-HSL、C10-HSL、C12-HSL、C14-HSL、3-oxo-C8-HSL、3-oxo-CiO-HSL、3-oxo-Ci2-HSL、3-oxo-Ci4-HSL 购买自美国Sigma。 5、群体感应 (quorum sensing, QS) 是细菌细胞间交流的一种通讯机制, 具有QS机制的细菌通过感知环境中低分子质量、可扩散的信号分子来调控菌体密度,并在信号分子达到阈值时启动相关基因表达, 从而调控细菌的生理行为, 以适应环境的变化。群体感应 (Quorum sensing, QS) 是微生物的一种细胞密度依赖的信号传感系统.它可以通过其自身分泌的信号分子感知细胞密度的变化, 一旦细胞密度达到阈值时, 会启动其调控的基因表达调控微生物群体的行为, 如生物发光、生物膜形成、群集运动、色素产生以及毒素产生等. 破坏病原菌群体感应系统可以显著降低其毒力因子的表达水平, 而不影响其生长繁殖, 理论上不会导致耐药性的形成. 6、细菌AHLs产物的检测实验方案取待检测菌在37度条件下，培养基6ｈ、12ｈ、18ｈ、24ｈ、30ｈ、36ｈ、42ｈ培养菌液，离心（10000转/min，10min)，取上清，保存备用。 LB中添加琼脂（琼脂添加量1％）灭菌后，将活化的报告菌紫杆菌CV026取5ml加入到50ml LB琼脂中，混合均匀后倒平板。待凝固后，在平板中间打孔，将待检细菌培养上清液加入孔中。在28度培养24ｈ，观察颜色变化，测量变色直径。CV026菌液自身的上清为阴性对照。 7、QS抑制剂检测实验:菌株CV026过夜活化两次后, 按2%接入量接种于含有20μg/m L卡那霉素的新鲜LB肉汤中, 160 r/min振荡培养16~18 h, 与100 m L含有20μg/ml C6-HSL (信号分子) LB营养琼脂培养基混合, 倒平板, 待凝固后用牛津杯打孔, 将200μL不同剂量的绿薄荷精油 (0.5、1.0、1.5μL/m L和2.0μL/m L) 加到孔中。将平板置于28℃条件下培养1~2 d, 观察紫色菌素的产生情况。以体积分数50%甲醇溶液作为阴性对照。 QS抑制剂 (QS inhibitors, QSIs) 是指那些可以阻断细菌种内或种间信息交流, 对细菌QS现象具有抑制或干扰作用的物质。

30°C， 卡那霉素抗性（10-20 ug/ml）

1、紫色杆菌（Chromobacterium violaceum) CV026，自身不产生N-酰基-高丝氨酸内酯（AHLs）类信号分子，仅当外源AHLs信号分子出现时，菌株才能够产生紫色菌素，并检测出环境中的信号分子C4-HSL～C8-HSL。

2、C.violaceum是一种革兰氏阴性菌, 其紫色杆菌素的产生受群体感应系统的严密调控, 可以作为群体感应抑制活性的筛选模型[1].C.violaceum ATCC12472是一种野生型紫色杆菌, 它可以自主产生信号分子调控紫色杆菌素的产生.而C.violaceum CV026是C.violaceum ATCC31532的mini-Tn5的突变体, 不能自主产生信号分子, 因此不会产生紫色杆菌素，只有当添加外源信号分子时, 才能启动其群体感应系统并产生紫色杆菌素[2].

3、CV026菌种的复苏：将-80℃保存的紫色杆菌CV026接种于LB肉汤，30℃过夜培养。以2%接入量接种于10 m L含有10μg/mL卡那霉素的LB肉汤中，30℃培养24h,用于后续实验。

4、AHLs标准品：C4-HSL、C6-HSL、C8-HSL、C10-HSL、C12-HSL、C14-HSL、3-oxo-C8-HSL、3-oxo-CiO-HSL、3-oxo-Ci2-HSL、3-oxo-Ci4-HSL 购买自美国Sigma。

5、群体感应 (quorum sensing, QS) 是细菌细胞间交流的一种通讯机制, 具有QS机制的细菌通过感知环境中低分子质量、可扩散的信号分子来调控菌体密度,并在信号分子达到阈值时启动相关基因表达, 从而调控细菌的生理行为, 以适应环境的变化。
群体感应 (Quorum sensing, QS) 是微生物的一种细胞密度依赖的信号传感系统.它可以通过其自身分泌的信号分子感知细胞密度的变化, 一旦细胞密度达到阈值时, 会启动其调控的基因表达调控微生物群体的行为, 如生物发光、生物膜形成、群集运动、色素产生以及毒素产生等. 破坏病原菌群体感应系统可以显著降低其毒力因子的表达水平, 而不影响其生长繁殖, 理论上不会导致耐药性的形成.

6、细菌AHLs产物的检测实验方案

取待检测菌在37度条件下，培养基6ｈ、12ｈ、18ｈ、24ｈ、30ｈ、36ｈ、42ｈ培养菌液，离心（10000转/min，10min)，取上清，保存备用。

LB中添加琼脂（琼脂添加量1％）灭菌后，将活化的报告菌紫杆菌CV026取5ml加入到50ml LB琼脂中，混合均匀后倒平板。待凝固后，在平板中间打孔，将待检细菌培养上清液加入孔中。在28度培养24ｈ，观察颜色变化，测量变色直径。CV026菌液自身的上清为阴性对照。

7、QS抑制剂检测实验:菌株CV026过夜活化两次后, 按2%接入量接种于含有20μg/m L卡那霉素的新鲜LB肉汤中, 160 r/min振荡培养16~18 h, 与100 m L含有20μg/ml C6-HSL (信号分子) LB营养琼脂培养基混合, 倒平板, 待凝固后用牛津杯打孔, 将200μL不同剂量的绿薄荷精油 (0.5、1.0、1.5μL/m L和2.0μL/m L) 加到孔中。将平板置于28℃条件下培养1~2 d, 观察紫色菌素的产生情况。以体积分数50%甲醇溶液作为阴性对照。
QS抑制剂 (QS inhibitors, QSIs) 是指那些可以阻断细菌种内或种间信息交流, 对细菌QS现象具有抑制或干扰作用的物质。