产品介绍

Genotype: F-, Δ(araD-araB)567, ΔlacZ4787(::rrnB-3), λ-, Δ(araH-araF)570(::FRT), ΔaraEp-532::FRT, φPcp8araE535, rph-1, Δ(rhaD-rhaB)568, hsdR514

BW27783（CGSC#12119）是一株大肠杆菌 K-12 BW25113 的衍生株，专门改造用于 pBAD 阿拉伯糖诱导系统的严格调控，也是小环 DNA（minicircle）生产菌株 ZYCY10P3S2T 的亲本。

一、基因型（核心改造点）

• F⁻, λ⁻, rph-1, hsdR514, Δ(rhaD-rhaB)568：与 BW25113 背景一致
• Δ(araD-araB)567：缺失阿拉伯糖代谢基因
• ΔlacZ4787(::rrnB-3)：lac 操纵子被三个串联 rrnB 转录终止子插入失活，本底极低
• Δ(araH-araF)570(::FRT), ΔaraEp-532::FRT：阿拉伯糖转运蛋白 AraE 的原生启动子被组成型启动子 φPcp8 替换（φPcp8-araE535），使 AraE 持续表达，细胞对阿拉伯糖均一响应

简单说：BW27783 = BW25113 基础上，敲掉 araD-araB 和 lacZ，把 araE 换成组成型启动子，让 pBAD 系统在低浓度阿拉伯糖下就能均一、可梯度诱导表达。

二、主要用途

• pBAD 诱导表达系统的理想底盘：因 AraE 组成型表达，对 L-阿拉伯糖响应均一、可梯度诱导，常用于严格控制 pBAD 启动子的实验
• 微环 DNA（minicircle）生产底盘：衍生株 ZYCY10P3S2T 在此基础上进一步引入 ΦC31 整合酶和 I-SceI 归巢内切酶，用于生产无细菌骨架的小环 DNA 载体

三、使用注意

• 原始 BW27783 存在 endA 活性：制备质粒或小环时可能出现 DNA 降解现象，文献中通过敲除 endA 得到 BWΔendA 来解决此问题
• 如需使用 lacI 缺失版本：可参考 MK01 工程株（BW27783 的 lacI::cat 衍生物），适用于需要同时独立调控 AraC 和 LacI 的实验

基本信息