大肠杆菌载体 E.coli Vector 大肠杆菌宿主菌株 E.coli 细菌广宿主载体 bacateria broad range host vector 链霉菌载体及菌株 Streptomyces 芽孢杆菌载体 Bacillus vector 芽孢杆菌宿主菌株 乳酸菌载体 lactic acid bacteria vector 乳酸菌宿主菌株 lactic acid bacteria strain 细菌基因敲除载体 毕赤酵母载体 毕赤酵母宿主菌株 酿酒酵母载体 酿酒酵母宿主菌株 丝状真菌载体 mold/fungi vector 乳酸克鲁维酵母载体 酵母真菌基因敲除基因编辑载体 植物细胞载体 plant cell vector 农杆菌菌株Agrobacterium tumefaciens strain 植物细胞基因敲除载体 plant cell 哺乳动物细胞载体 哺乳动物细胞荧光载体 荧光素酶报告基因载体 哺乳动物细胞基因敲除基因编辑载体 杂交系统 慢病毒载体 腺病毒载体 逆转录病毒载体 杆状病毒表达载体 基因干扰 RNAi载体 基因/cDNA/ORF 转座子质粒系统 transposon 金黄色葡萄球菌载体 staphylococcus aureus 假单胞菌载体 噬菌体 phage 不动杆菌载体 双岐杆菌载体 藻类表达载体 链球菌载体 厌氧菌载体 基因治疗载体 大肠杆菌突变株 细菌荧光质粒 白色念珠菌载体 体外转录载体 谷氨酸棒杆菌载体 酿酒酵母基因突变体菌株 线虫载体 斑马鱼载体 Zebra fish 果蝇，昆虫载体Drosophila 鱼类细胞载体 fish cell 分支杆菌载体 克雷伯菌
| 产品编号 | 产品名称 |
| pK18mobSacB载体, 广泛用于细菌基因敲除的一种载体 |
pK18mobsacB载体使用范例
pK18mobsacB系列自杀性载体用于苜蓿中华根瘤菌SmdesA基因缺失突变株的构建，步骤如下：
（1） 以苜蓿中华根瘤菌Rm1021基因组DNA为模板，通过PCR分别扩增出SmdesA基因的上下游片段(Up，Down)，重叠PCR将SmdesA基因上下游片段连接起来扩增得到SmdesA (UpDn)，连接到pMD19-T，送测序。
（2） SmdesA (UpDn)用限制性内切酶EcoRⅠ和HindⅢ消化DNA片段后，连接到用相应限制性内切酶消化的pK18mobsacB载体上，得到pK18mobsacB-SmdesAUpDn。
（3） 用限制性内切酶HindⅢ 酶切p34S-Gm（抗体片段提供载体）回收Gm片段，将其接到pK18mobsacB-SmdesAUpDn载体上，得到pK18mobsacB-SmdesAUpDnGm，命名为pMJC4。
（4） 将pMJC4转化大肠杆菌S17-1菌株，与苜蓿中华根瘤菌野生型菌株RM1021在TY平板上30℃共培养48 h，然后将接合产物用1 ml TY液体培养基悬浮并稀释至1/105后布于添加有Km、Gm和Cm抗性的TY平板上，30℃培养72-96 h后得到单菌落。
（5） 选取单菌落培养抽提细菌总DNA．通过S1/S2引物和P1/P4引物进行PCR检测，获得一次重组菌株(整个质粒整合到苜蓿中华根瘤菌基因组中)。
（6） 将一次重组菌株在添加Cm的TY液体培养基中30℃培养72 h，将培养物稀释布于添加Cm的TY固体培养基上，将生长出来的单菌落分别转移到含有10%蔗糖、Cm和Km、Gm两种不同的TY固体培养基上，进行二次重组菌落的筛选．挑取对蔗糖不敏感而对Km和Gm敏感的单菌落培养并抽提总DNA，对备选菌株进行PCR验证．
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