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CRISPR基因编辑

敲除lpxM基因,构建低毒力大肠杆菌,适合BL21(DE3),Nissle1917等菌株用来表达重组抗原。

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敲除lpxM基因,构建低毒力大肠杆菌,适合BL21(DE3),Nissle1917等菌株用来表达重组抗原。

产品介绍

利用CRISPR-Cas技术敲除大肠杆菌BL21(DE3)脂多糖生物合成途径中的lpxM,改变其毒性中心类脂A的侧链结构;在基因组中整合表达tig提供蛋白折叠所需伴侣因子;构建pET-28a-Rcodon重组载体,补充蛋白表达所需稀有密码子对应的tRNA。 lpxM缺失后菌体细胞内毒素合成水平较出发菌株降低90%左右;利用改造后的重组菌株和载体,可显著提高鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白的可溶性表达水平;临床安全性试验结果表明,重组菌株BL21(DE3) ∆lpxM: : tig合成内毒素的毒力水平较出发菌株显著降低,表达抗原对应免疫组个体无任何临床免疫副反应出现。

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